Sputumundersøgelse for tuberkulose (mycobakterier, MBT)

For at opdage sygdommen i det indledende trin skal du bestå en sputumtest for tuberkulose (mikroskopi og en udtværingskultur).

Sputum er en slimhindet forbindelse, der findes i bronchi og lunger. Under normale sundhedsmæssige forhold dannes disse forbindelser overhovedet ikke. Og med svækket immunitet eller andre ledsagende faktorer øges produktionen af ​​en sådan sekretion i bronkierne kraftigt. Og dette bidrager til den hurtige indgang af tuberkulosebaciller i sputum med efterfølgende infektion i kroppen. Hvis hosten fortsætter i mere end 1 måned, skal fluorografi udføres. Hvis der findes en forsegling med en diameter på mere end 1 cm i billedet, sendes personen til sputumanalyse for tuberkulose..

Generel information

Hvis en person er inficeret med Kochs bacillus, vil sputum helt sikkert komme ud, omend i små mængder. I farve har den en purulent-slimet skygge med små blodige pletter..

Tilstedeværelsen af ​​blod er typisk for den avancerede fase af tuberkulose (kavernøs). I de indledende faser af infektionen observeres blod praktisk taget ikke. Generel analyse af sputum i mere avancerede stadier kan desuden vise krystaller og elastiske fibre. Derudover øges niveauet af proteinforbindelser, og tuberkulære baciller er til stede.

Sputumanalyse udføres ved hjælp af en bakteriologisk udstrygning (udstrygningsmikroskopi udføres, så sås det), som undersøges senere under et mikroskop.

Hvis resultatet er negativt, er det bydende nødvendigt at teste igen for tilstedeværelsen af ​​tuberkuløse baciller og forbindelser. Den anden test tages ikke tidligere end 1 måned.

Sputumanalysealgoritme

1. Efter prøveudtagning af biomaterialet udarbejdes et specielt værktøj, der hjælper med at undersøge bakteriologiske forbindelser under et mikroskop.
2. Endvidere gnides sputum mellem to laboratoriespejle og placeres over brænderen.
3. For den korrekte undersøgelse af biologisk materiale til tilstedeværelse af tuberkulosepatogener skal det farves med et specielt middel i henhold til metoden Gross eller Ziehl-Nielson.
4. Analysen af ​​sputum for mycobacterium tuberculosis viser ved den første undersøgelse et følsomhedsniveau på ca. 80%. Med hver efterfølgende følsomhed øges op til 98%.
5. Sputumkulturtank bør ikke forekomme senere end 2 timer efter opsamling.
6. Efter påvisning af mycobakterier bestemmes følsomheden over for visse antibiotika.
7. Koncentrationen af ​​tuberkulære baciller, der overstiger 100 pr. 1 ml, indikerer en meget alvorlig form for sygdommen.

Testen skal udføres mindst 3 gange, da resultatet for hvert nyt hegn er mere præcist. Hvis det efter den første analyse er negativt, betyder det ikke fraværet af sygdommen. For den endelige dom skal du få et negativt resultat mindst 3 gange. Derudover kan han tale om det tidligste stadium af sygdommens udvikling, hvor det stadig er umuligt at identificere en tuberkelbacillus.

Generelle regler for opsamling af sputum

Hvis du overvejer spørgsmålet: Sådan testes du for tuberkulose, så hjælper følgende anbefalinger:

• Før opsamling af sputum udsteder lægen en speciel beholder, hvori du har brug for at samle materialet;
• For at rydde mundhulen fra madrester - sørg for at skylle munden og børste tænderne;
• Før opsamling skal du trække så meget luft som muligt ind i lungerne og hoste;
• Efter hoste spytter du materialet i beholderen og lukker låget tæt;
• Lad ikke spyt trænge ind i beholderen, det er sputum fra lungerne, der er nødvendigt.
• Hvis du ikke kan få slim med hoste, skal du banke på brystet med knytnæven eller trække vejret over den varme damp, og gentag derefter proceduren;
• Hvis det ikke er muligt at samle hemmeligheden igen, ordineres patienten Bromhexine eller Ambroxol.

Forskningsmetoder

I alt er der 2 metoder til diagnosticering af sputum i tuberkulose: bakteriologisk og mikroskopisk. I begge tilfælde vil dekrypteringen være i form af CUB + eller CUB-. Sputumundersøgelser for tuberkulose slutter med definitionen af ​​patogene mycobakterier i sammensætningen eller deres fuldstændige fravær.

1. Med en negativ CFR er muligheden for infektion med tuberkulose udelukket, og en dvælende hoste kan indikere en anden lungeinfektion.
2. I nærværelse af CUB + udføres et yderligere enzymimmunassay. ELISA henviser også til laboratoriemetoder til lungetuberkulose. Det kan hjælpe dig med at stille en mere nøjagtig diagnose..

IFA-algoritmen er som følger:

• Sputum fortyndes i en speciel opløsning, og der tilsættes specifikke antistoffer;
• Efter kombination af disse komponenter bestemmes det, hvor mange antigene forbindelser der er i det bakteriologiske miljø..
• Som et resultat af disse data bestemmes det, hvor mange gange koncentrationen af ​​mycobakterier i 1 ml overskrides. undersøgte væske. Baseret på resultatet stilles en diagnose, og der udvikles en yderligere behandlingsregime..

I bakteriemetoden placeres det indsamlede materiale i et specielt medium, der fremmer væksten af ​​mycobakterier. Efter 10-20 dage udføres forskning for tilstedeværelsen af ​​tuberkuløse forbindelser og deres koncentration. Det tager ganske lang tid at tage tests ved hjælp af denne metode, da det tager tid at dyrke patogene bakterier under laboratorieforhold. I nogle tilfælde kan eksekveringstiden overstige 1 måned. På grund af dette har denne metode mistet sin popularitet blandt patienter..

Sikkerhedsteknik

Artiklen er kun til orientering og er ikke en direkte guide til handling. Inden du uafhængigt ordinerer test til dig selv, skal du helt sikkert konsultere din læge og følge hans instruktioner..

Hvor meget og sigt

Prisen for diagnostiske tests afhænger direkte af laboratoriet, hvor forskningen skal udføres, og placeringen. For eksempel vil omkostningerne ved tjenester i Moskva koste mere end i Samara og omvendt. For at få de nødvendige oplysninger skal du ringe til laboratorieinstitutionens register og tjekke der. Omkostningerne overstiger normalt ikke 400 rubler.

Analysetiden er ret kort, det tager kun 2 arbejdsdage at forberede alle resultaterne.

Laboratoriemetode til påvisning af MBT

Undersøgelsen af ​​sputum på kontoret har stor epidemiologisk og klinisk betydning..

Det er bedre at samle sputum om morgenen. Patienten skal først skylle munden, så der er mindre spyt i sputumet. Med en lille mængde sputum opsamles det i løbet af dagen. I mangel af sputum bør dets udseende være forårsaget af irriterende indånding af en aerosol af en hypertonisk opløsning af natriumchlorid med sodavand. Undersøg også det bronchiale skylningsvand opnået efter introduktion gennem luftrøret af 10-12 ml varm isoton natriumchloridopløsning.

Sputumundersøgelse begynder med sin undersøgelse. Hos patienter med lungetuberkulose kan sputum have striber eller blodpropper, stykker forkalkede bronchiale sten - bronchiolitis. Mikroskopisk undersøgelse af plettet sputumudstryk hos patienter med ødelæggelse af lungevæv afslører elastiske fibre. Nogle gange er der såkaldte koralfibre, som dannes som et resultat af aflejring af fedtsyrer på de elastiske fibre samt kalkdækkede elastiske fibre og amorfe kalkpartikler. For at opdage det i kontorets sputum undersøges det gentagne gange og sender morgendelen til laboratoriet i mindst 3 på hinanden følgende dage. I nogle tilfælde kan MBT påvises i sputum, og i fravær af røntgenændringer i lungerne. I dette tilfælde kan ulcerøs tuberkulose i bronchus ikke udelukkes. Sputumtestning skal udføres inden påbegyndelse af kemoterapi mod TB..

Påvisning af MBT i patologisk materiale udføres ved bakterioskopiske, bakteriologiske (kulturelle) og biologiske metoder. Ud over sputum kan urin, afføring, cerebrospinalvæske, ekssudat fra hulrum, biopsier af forskellige væv også være genstande til undersøgelse på kontoret..

Den vigtigste metode til påvisning af MBT er bakterioskopisk. I mange udviklingslande bruges det i vid udstrækning ikke kun til diagnosticering, men også til identifikation af patienter med tuberkulose under masseundersøgelser af befolkningen..

Med direkte bakterioskopi farves præparatet ifølge Ziehl-Nielsen-metoden: først med en carbolisk opløsning af fuchsin og derefter efter misfarvning med en 5% opløsning af svovlsyre eller 3% opløsning af saltsprit med en 0,25% opløsning af methylenblåt. Farvede præparater er mikroskoperet med et nedsænkningssystem. MBT er farvet i rødt, og den omgivende baggrund og ikke-syreresistente mikroorganismer - i blåt (fig. 5).

Opløsningen af ​​den bakterioskopiske metode til påvisning af MBT stiger med 14-30%, når der anvendes luminiscensmikroskopi. Til farvning af stoffet anvendes fluorokromer - organiske farvestoffer, der fluorescerer, når de belyses med ultraviolette, violette eller blå stråler. Sådanne farvestoffer er auramin 00, rhodamin C. Lægemidlet undersøges ved hjælp af et fluorescerende mikroskop. MBT lyser gylden gul på en mørk baggrund (fig. 6).

Til påvisning ved hjælp af den bakterioskopiske metode til MBT i præparatet er det nødvendigt, at mindst 100.000 mikrobielle legemer er indeholdt i 1 ml sputum. Med færre mycobakterier kan undersøgelsen give et falsk negativt resultat. For at øge mængden af ​​MBT i en enhed af det undersøgte volumen af ​​sputum anvendes flotations- og sedimenteringsmetoder, især med negative resultater af direkte bakterioskopi.

Den mest udbredte metode er flotation, baseret på det faktum, at den vandige suspension med kulbrinte MBT efter omrystning flyder til overfladen sammen med det dannede skum. Benzin, benzen, xylen anvendes som kulbrinter. En cremet (flotationsring) dannet på overfladen af ​​carbonhydridpartikler med mycobakterier tjener som et materiale til fremstilling af præparater. Når du bruger flotationsmetoden, øges de positive resultater af bakterioskopi med 10%.

Den bakteriologiske (kulturelle) metode til påvisning af MBT består i såning af sputum på næringsmedier. Før såning behandles sputum for at undertrykke væksten af ​​ikke-specifik sputumflora. Standardnæringsmediet til MBT-dyrkning er Levenshtein-Jensen fast ægmedium. Der er også halvflydende og flydende kulturmedier. Væksten af ​​MBT-kultur sker i 14-90 dage.

For at isolere MBT-kulturen er 20-100 mikrobielle celler i 1 ml sputum tilstrækkelige. At opnå en ren kultur af mycobakterier giver dig mulighed for at bestemme deres levedygtighed, virulens såvel som følsomhed over for stoffer.

Ofte vokser mycobakterier, der påvises under bakterioskopi, ikke på næringsmedier på grund af tabet af deres evne til at reproducere under indflydelse af kemoterapi. Ifølge den bakteriologiske undersøgelse udføres en kvantitativ vurdering af bakteriel udskillelse: sparsom - op til 10 kolonier på mediet, moderat - fra 10 til 50 og rigeligt - mere end 50 kolonier.

Den biologiske metode består i forurening med marsvinens sputum, som er meget følsomme over for MBT. Før infektion af marsvinet behandles sputum med svovlsyre for at ødelægge uspecifik mikroflora og centrifugeres. Sedimentet i isotonisk natriumchloridopløsning injiceres subkutant i lysken, intraperitonealt eller i testiklen. For at reducere marsvinets modstand mod MBT injiceres store doser kortison dagligt. Cirka en måned efter infektion har fåresyge forstørrede lymfeknuder og udvikler generaliseret tuberkulose.

Indtil for nylig blev den biologiske metode blandt metoderne til påvisning af MBT og diagnosticering af tuberkulose betragtet som den mest følsomme, da tuberkulose hos marsvin kan være forårsaget af introduktion af sputum indeholdende mindre end 5 mikrobielle legemer i 1 ml. I øjeblikket er muligheden for tab af MBT-virulens blevet bevist. Sådanne mycobakterier er levedygtige, kan vokse på næringsmedier, men forårsager ikke sygdom hos forsøgsdyr. Derfor er det nødvendigt at anvende forskellige metoder til mikrobiologisk forskning for at identificere MBT i det patologiske materiale..

Blodprøve. Små ændringer observeres normalt i blodet hos patienter med tuberkulose. Hypokrom anæmi bestemmes kun hos patienter med en udbredt proces og alvorlig forgiftning eller med gentagen lungeblødning. ESR øges i perioder med forværring af den tuberkuløse proces. Ændringer i antallet af leukocytter og leukocytblodtællinger forekommer hovedsageligt under akutte processer og henfald af lungevæv. Leukocytose, en stigning i stab neutrofiler, lymfopeni, monocytose, eosinopeni kan forekomme..

For at vurdere patientens tilstand, hans uspecifikke og specifikke reaktivitet samt for at bestemme aktiviteten af ​​den tuberkuløse proces og valget af optimal behandlingstaktik er det vigtigt at bestemme nogle biokemiske og immunologiske parametre.

Hos patienter med tuberkulose, der udskiller en stor mængde sputum med rigelig purulent pleural ekssudat, amyloid nyredosis, kan hypoproteinæmi forekomme i modsætning til patienter med andre former for tuberkulose. Ved akut tuberkuløs betændelse falder albumin-globulin-koefficienten, indholdet af fibrinogen og sialinsyrer i plasmaet stiger, og C-reaktivt protein vises.

For at kontrollere den funktionelle tilstand i leveren i blodet undersøges indholdet af alanin og asparaginaminotransferaser, alkalisk phosphatase, bilirubin, niveauet af restkvælstof, urinstof, kreatinin bestemmes, og koagulationstest udføres med blodserum - thymol, sublimat. For at udelukke diabetes mellitus, som ofte kombineres med tuberkulose, bestemmes blodsukkeret.

For at bekræfte den tuberkuløse ætiologi af sygdommen anvendes et enzymimmunoanalyse baseret på antigen-antistofreaktionen. Hvis der er mistanke om immundefekt i blodserumet, bestemmes indholdet af immunglobuliner. For at diagnosticere immundefekt og kontrollere dets forløb bestemmes antallet af B- og T-lymfocytter.

Med aktiv tuberkulose er alle immunologiske reaktioner positive, og deres sværhedsgrad afhænger af fasen af ​​den tuberkuløse proces. Hos patienter med et gunstigt forløb af tuberkulose er reaktionen af ​​eksplosionstransformation af lymfocytter mest udtalt, og hos patienter med et progressivt forløb er reaktionen med inhibering af migration af leukocytter i nærværelse af PPD-tuberkulin mest udtalt. Ved et udbrud af processen falder antallet af T-roset-dannende lymfocytter, og antallet af B-roset-dannende lymfocytter øges, mens indholdet af G- og A-immunglobuliner falder.

Immunologiske tests anvendes til differentiel diagnose af tuberkulose. For eksempel i kræft og sarkoidose er der i modsætning til tuberkulose en undertrykkelse af aktiviteten af ​​G-lymfocytter i reaktionen af ​​blasttransformation med PHA, hos de fleste patienter er der negative reaktioner af blasttransformation af lymfocytter og migration af leukocytter med PPD.

Urinundersøgelse. Hos patienter med lungetuberkulose giver urinanalyse normalt ikke signifikant diagnostisk information, men nogle gange afslører den alvorlige komplikationer af den underliggende sygdom. Med nyretuberkulose findes protein, leukocytter, ofte erythrocytter samt MBT i urinen. Med komplikationen af ​​lungetuberkulose ved amyloidose observeres vedvarende proteinuri og mikrohematuri. Ved udskillelse af 17-ketosteroider og 17-oxykortikosteroider med daglig urin vurderes binyrebarkens funktionelle tilstand.

Påvisning af mycobakterier gennem sputumanalyse

Tuberkulose er en farlig sygdom forårsaget af flere typer mycobakterier. Sygdommen kan påvirke forskellige organer hos en person: lunger, øjne, nervesystemet, men den mest almindelige type tuberkulose er lungeformen. Patogenet overføres af luftbårne dråber gennem spyt, blod, nogle gange gennem jord eller mad.

Tidlig diagnose af tuberkulose er af social betydning. For at opdage sygdommen for hele befolkningen under 14 år udføres normalt en tuberkulinprøve årligt - Mantoux-reaktionen senere - en årlig fluorografi. Der er situationer, hvor barnets Mantoux-test viste sig at være positiv, eller der blev fundet en mørkfarvning på billedet - mistanken om tuberkulose. I disse tilfælde er yderligere diagnostik nødvendig, som vil koordinere yderligere behandlingsforanstaltninger eller fjerne mistanke om sygdommen..

Sputumanalyse til påvisning af tuberkulose er en af ​​de mest nøjagtige metoder til identifikation af patogener. Det kræver flere prøver, men denne foranstaltning er en garanti for dens pålidelighed. Du kan tage det gratis med en læges henvisning på en tuberkuloseafdeling eller på en privat klinik.

Indikationer og kontraindikationer til analysen

Sputumanalyse for tuberkulose kan afsløre sygdommens lungeform. Normalt er indikationen for det langvarig hoste (med eller uden sputum), mørkere på røntgen og en stigning i patientens temperatur. Undersøgelsen af ​​sputum er inkluderet i komplekset af obligatoriske undersøgelser, der er nødvendige for diagnosen tuberkulose.

Uden fejl udføres indsamlingen af ​​sputum til mycobacterium tuberculosis også, når patienten i lang tid (mere end 3 måneder) lider af en tør eller uproduktiv hoste, der ikke reagerer på standardbehandling med bronkitismedicin. Samtidig skal man være opmærksom på sputumsammensætningen, hvis den er til stede: med lungetuberkulose adskilles den i små mængder, i sammensætning er den slimopurulent (overskyet hvid, gullig, grålig farve), i de senere stadier har den blodstriber.

På grund af det faktum, at analysen af ​​sputum til CD (det forårsagende middel til tuberkulose) ikke kun kan udføres med direkte ekspektoration, men også ved hjælp af bronkoskopi, har det nogle kontraindikationer.

Bronkoskopi til tuberkulose kan udføres til diagnostiske formål, hvis patienten har en tør hoste uden sputumudledning, og det ikke er muligt at samle det i en beholder.

Sputumopsamling ved bronkoskopi indebærer indsættelse af et rør i de øvre luftveje ved lokal eller generel anæstesi. På grund af procedurens detaljer kan den ikke udføres:

• mennesker, der er allergiske over for smertestillende medicin,
• patienter, der har haft et hjerteanfald eller slagtilfælde i de næste 6 måneder før undersøgelsen,
• patienter med epilepsi og skizofreni,
• patienter med svær åndedrætssvigt,
• patienter med blødningsforstyrrelser,
• med stenose i strubehovedet eller luftrøret.

For børn udføres bronkoskopi med tilladelse fra forældrene. Afhængig af barnets alder træffes der en beslutning om generel eller lokalbedøvelse. Der er flere indikationer for denne procedure, hvis du har mistanke om tuberkulose, end der er kontraindikationer.

Bronchoskopiproceduren er sikker og forårsager sjældent komplikationer (ca. 1 ud af 5000 tilfælde), hvoraf de fleste er reversible. Komplikationer er kun mulige med en nødbronkoskopi (hvis den ikke udføres til diagnostik, men til genoplivningsformål - for eksempel for at fjerne et fremmedlegeme).

Forberedelse, gennemførelse og udskrift

Hvordan doneres sputum til analyse? Før lægen gennemfører en undersøgelse, forklarer lægen normalt detaljeret, hvordan man gør det korrekt. Hvis patienten mistænkes for lungetuberkulose, indsendes sputum tre gange for at opnå et pålideligt resultat.

Det er nødvendigt at samle sputum for første gang om morgenen på tom mave, efter at have tidligere diskuteret med lægen behovet for at tage en slimløsende.

Det tilrådes at skylle munden med vand inden test. Sputum ved hoste (som regelmæssigt forekommer hos en patient med tuberkulose) spytter i en speciel steril beholder, som indledningsvis gives til patienten inden diagnose.

Anden gang er det nødvendigt at passere sputum 4 timer efter den første test, også på tom mave. For ikke at sulte patienten tages den første prøve normalt om natten, den anden om morgenen. Reglerne for opsamling af sputum indeholder tilsyn med medicinsk personale til korrekt indsamling af tests, men patienten kan også uafhængigt indsamle materiale. Den tredje sidste gang opsamles spyt på en dag. Det indsamlede materiale skal overføres til laboratoriet senest 2 timer efter anbringelse i beholderen.

Ved opsamling af sputum ved bronkoskopi skal patienten forberede sig på forhånd: spis eller drik ikke i mindst 6 timer. Normalt udføres en sputumtest for tuberkulose om morgenen. Afhængigt af hans tilstand får patienten lokal eller generel anæstesi, hvorefter der indføres et bronkoskop gennem halsen i luftrøret, ved hjælp af hvilken lægen enten tager sputum til undersøgelse eller fjerner dets overskud fra bronkierne for at sikre normal vejrtrækning. Efter undersøgelsen er det forbudt for patienten at tage blodfortyndende medicin (aspirin).

Hvis det er nødvendigt at gennemføre en bakterioskopisk undersøgelse, udføres sputumkulturen, eller rettere, kulturen af ​​de bakterier, den indeholder.

Til dette forberedes et præparat - sputumet gnides mellem glasstykkerne, farves med en speciel forbindelse og opvarmes. Derefter vurderer laboratorieassistenten podestoffet - han ser hvilke bakterier der er vokset på glasset og ud fra dem konkluderer han en konklusion om patientens tilstand.

For at dechiffrere resultaterne af sputumanalyse vurderes det:

• mængde, farve,
• konsistens,
• inklusioner (blod eller andet),
• bakteriologisk sammensætning.

Det er nødvendigt at udføre undersøgelser mange gange for at udelukke muligheden for et falsk negativt resultat - dette kan forekomme, hvis antallet af bakterier i en bestemt prøve er utilstrækkelig til at blive bestemt af testen. Sputumanalyse for pålidelighed er nødvendig mindst tre gange, men hvis resultaterne er tvetydige, kan der kræves yderligere prøver.

Fordele og ulemper ved analyse

Sputumanalyse for VC (eller CD) har et klart plus: det er en mulighed for at identificere sygdommen i de tidlige stadier og bekræfte den med næsten hundrede procent nøjagtighed. Testen, der giver flere prøver, giver dig mulighed for entydigt at bestemme tilstedeværelsen af ​​tuberkulosepatogener i kroppen. Det giver mulighed for en vis variation i adfærden, hvilket er praktisk for patienter under forskellige tilstande..

Hvis vi ikke taler om bronkoskopi, er testen ret enkel at udføre for patienten og kræver ikke særlig træning for at gennemføre den..

Ulempen ved sputumanalyse er den lange ventetid på resultaterne. På grund af dens alsidighed skal den bakteriologiske test vente fra 3 til 8 uger - dette skyldes modning af bakteriekulturerne. Ulemperne inkluderer også det faktum, at hvis der er mistanke om tuberkulose, men der ikke er hoste, skal patienten ikke gennemgå den enkleste procedure med bronkoskopi, desuden for at gøre det gentagne gange.

Metoden har ingen bivirkninger, den kræver ikke bloddonation eller administration af noget lægemiddel. Faktisk foregår indsamlingen af ​​materiale (sputum) naturligt for patienten uden problemer. Denne kendsgerning er især vigtig for børn, der har svært ved at indsamle blod eller andre diagnostiske procedurer..

For at opnå et pålideligt resultat er det nødvendigt at undersøge materialet opnået ved forskellige metoder - dette bestemmer varigheden af ​​laboratoriediagnostik. Kun bakteriologisk analyse udelukker ikke helt muligheden for en sygdom - det er også nødvendigt at inokulere sputum på næringsmedier, hvilket tager ganske lang tid.

Fordelen ved sputumanalyse er også det faktum, at analysen af ​​den kvalitative sammensætning gør det muligt at identificere forskellige sygdomme i de øvre luftveje, ikke kun af bakteriologisk karakter, men også tumor- og obstruktive processer (lungekræft, bronchial astma osv.). Således tillader det ikke kun at bekræfte eller udelukke tuberkulose, men også at fastslå årsagen til patientens sygdom med stor nøjagtighed..